Дальнобойщик Фёдор Иванович Афанасьев и его напарник Алексей Кузнецов попадают в аварию. Алексей лишается ноги. Фёдору дают другого напарника-Александра Коровина, который восстановил КамАЗ после аварии. Напарник молодой и Фёдору он поначалу приходится не по нраву. Дальнобойщикам предстоит доставить из Москвы в Ростов-на-Дону гуманитарный груз для раненых в Чечне бойцов. В состав груза входят 15 коробок болеутоляющего наркотического вещества. О том, какой груз везут Фёдор и Александр становится известно бандитам и они начинают их преследовать на «восьмёрке».

Коровин и Фёдор Иваныч приехали на химбазу за кислотой, но по запарке начальника базы в цистерну был залит взрывоопасный и токсичный окислитель. Дальнобойщики, не подозревая об этом, спокойно отправляются в Чебоксары. Начальник химбазы поднимает панику, но в спецслужбы звонить не торопится во избежании уголовного преследования за преступную халатность. Вместе с неким Ванукяном они предпринимают поиски Александра и Фёдора, но безуспешно-потому что мобильный телефон, оставленный Фёдором в машине был украден. Дальнобойщики тем временем гостят у Вероники (Дарья Михайлова)-родственницы жены Фёдора Иваныча, где между ней и Коровиным возникла симпатия. Только тогда подключают МЧС и милицию. Те в свою очередь организовывают сопровождение и охлаждение цистерны с помощью пожарных машин и все заканчивается песней «Три танкиста» в исполнении Федора Ивановича и Санька, принявших «на грудь» для снятия стресса.

Двое напарников-«дальнобойщиков» забирают груз и сопровождающую его женщину-экспедитора Марину с места аварии на шоссе, где погибли два водителя. По пути Марина рассказывает им страшные истории об убийстве на трассе водителей. Милиция начинает расследование и выясняет, что настоящий экспедитор найдена мертвой у дороги, а из психиатрической спецлечебницы сбежала пациентка. Об этом Федор узнает от сыщиков по мобильному телефону. Марина, видимо, заподозрив неладное, прыскает в лицо Иванычу нервно-паралитическое ОВ и пытается выпрыгнуть из машины. Саньку чудом удается остановить грузовик на краю карьера. Именно здесь много лет назад Марина была зверски изнасилована, после чего ее отец умер от сердечного приступа, а она стала страдать расстройствами психики.

Фуру дальнобойщиков арендуют неизвестные люди кавказской национальности. Они загружают её ящиками с видеокассетами и наказывают отвезти груз по назначению, а сами сопровождают машину на «Волге». По пути Фёдора с Саней останавливают рэкетиры, но подъехавшие «хозяева» груза разбираются с ними по-своему. Потом они всей компанией заворачивают «на свадьбу к родственнику», где «сопровождающие» берут оружие. Сдав груз и немного отъехав, напарники по радио узнают о взрыве на складе, где они разгружались — видеокассеты с порнографией, которые они везли, были начинены взрывчаткой. Поняв, что «влипли», они пытаются «оторваться» от бандитов. Начинается погоня со стрельбой. От настигших их убийц героев спасает подоспевший спецназ.

Иваныч и Сашок случайно спасают от изнасилования на обочине молодую девушку, которая выдаёт себя за дочку олигарха, чему Иваныч не поверил. Порешили мужики: довезут быстро девку и поедут дальше. Но не тут то было: девушка доставила им много хлопот.. В конце концов ей понравились мужчины, одному из них (Сашку) даже захотела отдаться, когда тот был пьян. А Иваныч привязался к девушке, как к родной, и решил удочерить. Но в этот момент девушка исчезает и появляется с папой… настоящим олигархом!

Из-за эпидемии холеры друзья-напарники вместе с «экипажами» других машин сидят на карантине. От вынужденного безделья у мужиков сдают нервы, и между Александром и другим водилой происходит драка, а через несколько минут того находят убитым ножом в шею. На рукоятке орудия преступления находят отпечатки пальцев Коровина. Он же утверждает, что дрался, но не убивал. Между тем Фёдор вместе с парнишкой-студентом начинают самостоятельные поиски убийцы. Подозрение падает то на одного, то на другого водителя, что настраивает их против Фёдора. Но он не может бросить товарища в беде и, в конце концов, находит неопровержимые доказательства вины напарника убитого.

Дальнобойщикам дают ответственное задание: отвезти в сопровождении ветеринара Светланы в другой город редкого горного козла для воспроизводства. Но на животное уже открыта охота: подпольный делец-коллекционер дает задание банде байкеров-рокеров отбить козла и привезти его голову. Моторизованные братки угоняют фуру, в которой запирают избитых водителей вместе со Светой. Неожиданно их освобождают «зелёные», вознамерившиеся провести «крупную рекламную акцию» — выпустить животное на волю. На деле они оказываются ещё худшими бандитами, чем мотоциклисты — один из них в приступе слепой ярости убивает байкера за то, что тот сжёг на костре лягушку. В критический момент ситуацию спасает Света, угрожая убить козла, если их всех не отпустят.

Жена дает Фёдору задание привезти из Липецка десять холодильников. В придорожной столовой населенного пункта Лебедянь Фёдор влюбляется с первого взгляда в официантку Зину. Сашок пытается уговорить напарника ехать дальше, но Иваныч всерьёз подумывает о женитьбе. Для сохранения брака Нины и Фёдора Сашок соблазняет Зину во время рассказов о помощи перебраться за границу, только для этого ему нужны были фотографии. Иваныч застаёт их и ссорится с Зиной. Фёдор: — Тебя, шнурок, не трону! Они отправляются за холодильниками. После очередного рейса Иваныч решает зайти к Зине, но застаёт её собирающей вещи для отъезда в Новую Зеландию. В конце серии она присылает Фёдору свою фотографию по электронной почте на адрес базы.

Федор и Саня везут цветы в Санкт-Петербург. По дороге они попадают в зону лесных пожаров и случайно выезжают на укромный дом, где находят группу молодых сектантов под предводительством «гуру», который истязает своих послушников. Огонь тем временем приближается к самому дому и машине дальнобойщиков. «Гуру» готовит акт массового самоубийства через самосожжение, но в последний момент друзьям удается спасти подростков от маньяка.

На одном из перекрестков подмосковного городка Федор встречает своего бывшего напарника Алексея, потерявшего ногу в аварии. Тот побирается, сидя в инвалидной коляске. Попытка помочь другу заканчивается тем, что Федора жестоко избивают братки, «охраняющие» инвалида, а потом его забирает милиция. Освободившись из милицейского отделения, Федор вместе с приятелем едет на квартиру к Лехе, но находит там настоящий бордель. Случайно ему удается отыскать бывшего напарника в захолустной общаге в обществе себе подобных калек. Протрезвевший наутро Алексей рассказывает банальную историю о том, как его сначала подобрала, а потом обобрала хозяйка борделя, отняв квартиру. Сашок, прикинувшись калекой, проникает в логово бандитов и достает компромат на «хозяйку» и ее подручных. Те попадают в места не столь отдаленные, а Алексей возвращается в свою квартиру.

Пока идёт разгрузка, группе заключённых под предводительством Падре удаётся вырезать дыру в полу фуры и забраться в неё. Они заставляют водителей изменить маршрут и ехать к указанному месту. Дальнобойщики идут на хитрость и завозят зеков в тупик, где ведутся ремонтные работы. Начавшиеся между беглецами разборки помогают водителям вместе с дорожными рабочими «повязать» беглецов.

Некто Денис Анатольевич фрахтует фуру для перевозки груза на Кавказ. В пути он признается, что груз — ворованный. Но обещает хорошо заплатить. Когда напарники не соглашаются, он шантажирует их тем, что они теперь его сообщники. В пути Сашка замечает следующую за ними машину с людьми. Денис поясняет, что это — нанятая им охрана груза. Потом появляется вторая. Дело кончается тем, что люди из второй взрывают машину с охраной и начинают преследование КамАЗа с грузом. Тогда Денис признается, что везет оружие. На ночной стоянке Сашка уговаривает путану напоить Дениса клофелином. И, оторвавшись от преследователей, они доставляют сонного Дениса вместе с грузом назад — к месту, откуда забирали. Аванс, естественно, они оставляют себе, ведь за него никто нигде не расписывался

Напарникам, доставившим груз в Сибирь, предлагают «халтуру»: перевезти партию водки с изображением местного губернатора, который баллотируется на второй срок. Сопровождают их братва на джипе и «бухгалтер», оказавшийся держателем местного общака. Но на подступах к городу дорогу преграждает пикет из противоборствующего лагеря действующего мэра. Федор с Сашкой случайно узнают, что помимо водки везут и огромную партию «общаковских» денег для грязных избирательных технологий губернатора. Хитростью им удается загнать фуру в болото, когда им на помощь как раз подходит ОМОН мэра. Все вместе они выясняют, что водка, презентованная мэром, — такая же дрянь, как и губернаторская.

Дальнобойщики подбирают на трассе отставшего от автобуса старика Петра Михайловича. Выясняется, что он, обладая феноменальной памятью, страдает ее провалами или, как он их называет, «выкидышами». По пути они останавливаются в придорожной гостинице, где действует банда карточных шулеров во главе с Сан Санычем по кличке Черный. Ничего не зная об этом, Сашка садится за карточный стол и проигрывает все деньги. Федор, желая вернуть проигранное, ставит на кон фуру и… проигрывает. Узнав об их беде, старик Михалыч спускается в зал — сыграть свою последнюю игру. И начинается поединок между ним и Черным, оказавшимся не только его старинным знакомым, но и бывшим коллегой по КГБ, из-за доноса которого старик отсидел срок и похоронил жену. Зная все уловки противника, Михалыч не только возвращает все проигранное напарниками, но и остается в прибыли. А Черному со своими сообщниками приходится подумать о том, как бы поскорее убраться.

На трассе напарники сбивают в кювет «восьмёрку». Из неё достают парня, представившегося Вованом, и везут его в село Вознесенское. По дороге их догоняют машины с кавказцами и требуют отдать им пассажира. Но в это время подъезжают местные бандиты, и отбив Вована, везут Фёдора и Сашку в сауну. Здесь мужики узнают, что спасённый ими Вован с подельниками изнасиловал 13-летнюю девочку-армянку. А догонявшие их кавказцы были её родителями и роднёй. Напарникам удаётся не только вырваться от «гостеприимных» бандитов, но и, захватив с собой Вована, доставить его кавказцам. Те отказываются от самосуда и вызывают милицию…

Напарники вместе с женой Федора, взявшей кредит под залог квартиры, выкупают небольшой склад, чтобы открыть собственное дело. В семье Федора начинаются склоки из-за денег. На Нину наезжают цыгане, требуя заплатить долги предыдущего владельца склада. Затем НС-скинхеды берут в заложники Нину, требуя дани. Сашка и Фёдор едут в гараж к водителям и просят их о помощи. Они приезжают к месту сборища «чернорубашечников» и устраивают тем «физвоспитание». После этого друзья решают завязать с «бизнесом» и продать склад.

Напарники по заказу Минздрава везут из Нижнего Новгорода на Украину груз. В пути случаются странные вещи: другие дальнобойщики и сотрудники АЗС рассказывают им, что уже видели их фуру какое-то время назад. А ночью Сашок убеждается в этом сам. Связавшись с хозяином груза, они понимают, что кто-то «косит» под их машину. Оказывается, конкуренты решили использовать их документы для перевозки крупной партии наркотиков. Федору и Сашке остается одно: попасть на границу с Украиной раньше, чем «машине-призраку». И они принимают решение срезать путь.

Очередной заказчик уговаривает Федора подстроить аварию, чтобы получить страховку за груз. Федор отказывается, зато соглашаются его приятели — двое братьев-«близнюков». Они пускают свою фуру накатом вниз по склону, но подоспевшие Федор с Сашком «спасают» машину «близнюков». Две следующие попытки братьев выполнить «уговор» с заказчиком так же заканчиваются ничем. А потом в дело вмешивается «специалист» по форс-мажорным обстоятельствам, который чуть не отправляет всех на тот свет. Но вместо них попадает туда сам. А «близнюков» опять спасают Федор с Сашком.

Напарники получают ответственное задание — аккуратно доставить к месту назначения партию «виноматериала», предназначенного для французского бизнесмена. Но по пути они подбирают мужчину с беременной женой, роды у которой начинаются прямо в дороге. Дальнобойщикам приходится принять появившегося на свет малыша, а женщину с родовой травмой срочно доставить в город. Фельдшер провинциального города не смог остановить кровотечение, и дальнобойщики принимают решение отвезти ее в Москву на вертолете с местной авиабазы. Выпросив под разными предлогами у жителей деревни необходимое количество керосина, они отправляют мать на вертолете. Все эти события не могли не сказаться на качестве перевозимого груза, но француз все-таки соглашается на сделку. Родившегося же мальчишку в честь спасителя нарекли Александром.

Сашок подозревает неладное в отношениях с Вероникой (племянницей Нины Ивановны). Сначала он думает что она беременна и ссорится с ней по этому поводу. Затем он узнаёт что Вероника собралась замуж за своего научного руководителя. Узнав об этом, он пытается угрожать «ботанику» монтировкой. Придя с цветами к квартире Вероники, Саша понимает, что она не одна, и в гневе ломает дверь и бьёт жениха, в результате чего попадает в милицию. Майор милиции, арестовавшая Сашка, становится на сторону потерявшего надежду дальнобойщика и предлагает ему устроить побег, но в случае провала «посадить по полной» (обвинить также в вандализме памятников). Сашок после уборки территории залезает на гаражи и спрыгивает на фуру, которую подогнал Фёдор. В ЗАГСе Вероника, увидев Сашка, раздумывает выходить замуж и сбегает с ним со свадьбы. Впоследствии, Вероника выходит замуж за Сашка (в сериале это не показано, однако в «Дальнобойщиках-2», она уже является женой Сашка)